Investigator Casework GO! Kit

Für die Direktamplifikation forensischer Fallproben

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Investigator Casework GO! Kit

Cat. No. / ID:   386546

Casework GO! Lysepuffer, Proteinase-K-Lösung und nukleasefreies Wasser
5.389,00 $
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KitZubehör
Casework GO! Kit
DTT
Das Investigator Casework GO! Kit ist für molekularbiologische Anwendungen in der Gerichtsmedizin, zur Personenidentifizierung und für Vaterschaftstests vorgesehen. Dieses Produkt ist nicht für die Diagnose, Prävention oder Behandlung einer Krankheit bestimmt.

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Eigenschaften

  • Lyse von forensischen Fallproben zur anschließenden Verwendung in Arbeitsabläufen mit Direktamplifikation
  • Maximierung der DNA-Ausbeute aus einer Vielzahl an Spurentypen
  • Ermöglicht das Y-Screening und die Auswahl von Beweisproben für STR-Tests

Angaben zum Produkt

Das Investigator Casework GO! Kit kann für die Lyse forensischer Proben auf einer Vielzahl von Substraten verwendet werden, darunter Abstriche bei sexuellen Übergriffen, Stoffstücke, Papier, Zigarettenstummel, Kaugummi und andere Probenarten. Die erhaltenen Lysate sind mit allen Investigator Quantiplex und Investigator STR QS Systemen kompatibel. Das Investigator Casework GO! Kit erfüllt die Anforderungen der ISO 18385.

Prinzip

Das Investigator Casework GO! Kit wird zur Vorbehandlung forensischer Proben in Arbeitsabläufen mit Direktamplifikation verwendet. Das Kit ermöglicht die Probenlyse ohne DNA-Aufreinigung, und das Lysat ist mit mehreren nachgeschalteten Optionen kompatibel, darunter die Kits Investigator Quantiplex Pro, Investigator Quantiplex Pro FLX und Quantiplex Pro RGQ oder Investigator 24plex QS, 26plex QS, ESSplex SE QS oder IDplex Plus. 

Das Investigator Casework GO! Kit kann für die Direktamplifikation von forensischen Spurenproben verwendet werden und ermöglicht so einen beschleunigten Arbeitsablauf in der Fallanalyse. Es ermöglicht die schnelle Verarbeitung von Abstrichen aus Spurenproben, u.a.bei sexuellen Übergriffen, oder anderen Materialien, ohne dass eine weitere Aufreinigung erforderlich ist. Das Lysat kann direkt für die Quantifizierung mit allen Investigator Quantiplex Assays oder für das DNA-Profiling mit allen Investigator STR-Assays verwendet werden (es sei denn, die Quantifizierungsdaten weisen auf mögliche PCR-Inhibitoren hin). 

Bei Screening-Analysen im Rahmen von sexuellen Übergriffen kann der Investigator Casework GO!-Workflow Entscheidungen über die Probenverarbeitung durch die Quantifizierung männlicher Sequenzen und die Bestimmung des Auto/Y-Verhältnisses erleichtern.

Verfahren

100–400 µl Casework GO! zu Master-Mixes zu der Proben in einem Röhrchen geben und 25 Minuten bei 60 °C inkubieren, gefolgt von weiteren 5 Minuten bei 80 °C. 2 µl dieses Lysats mit dem Quantiplex Pro Kit oder bis zu 18 µl mit dem Quantiplex Pro FLX Kit quantifizieren und bis zu 15 µl des Lysats für die Amplifikation mit dem Investigator STR QS Kit einsetzen.

Anwendungen

Spurenanalyse

Viele Proben aus Straftaten mit hohem Aufkommen (z. B. Einbrüche oder Delikte im Zusammenhang mit Kraftfahrzeugen) werden nicht getestet, weil die Mittel oder die Zeit für die Präparation der Proben nicht ausreichen. Mit dem Investigator Casework GO! kann der Schritt der Probenvorbereitung entfallen, wodurch sich DNA-Profile schneller und kostengünstiger erstellen lassen und DNA-Tests für eine größere Anzahl an Tatortproben mit hohem Aufkommen praktikabler werden könnten. Wertvolle Informationen zum Workflow, wie beispielsweise das Vorliegen/Fehlen von männlicher/gesamter menschlicher DNA, der DNA-Degradation oder das Vorliegen potenzieller PCR-Inhibitoren lassen sich gewinnen, wenn das Investigator Casework GO! Kit in Kombination mit den Quantiplex Pro Kits oder Investigator STR QS Kits verwendet wird.

Beweise bei sexuellen Übergriffen/Y-Screening

Viele Beweismittel bei sexuellen Übergriffen liegen monate- oder sogar jahrelang in der Asservatenkammer, weil die Gewinnung von PCR-fähiger DNA zu aufwändig und kompliziert ist. Der Einsatz eines „Direkt-zur-DNA“-Ansatzes im Einklang mit den neuesten SWGDAM-Empfehlungen maximiert die Chancen, dass nur solche Proben weiterverfolgt werden, für die sich eine vollständige Aufarbeitung lohnt. Der Investigator Casework GO! Quantiplex Pro FLX-Workflow bestimmt das Verhältnis zwischen männlicher und weiblicher DNA und prognostiziert die PCR-Hemmung und die Degradation der Probe. Er ermöglicht somit ein schnelles Y-Screening und eine Qualitätsbewertung für die Auswahl von Beweisproben für weitere STR-Tests.

Ressourcen

Quick-Start Protocols (1)
Supplementary Protocols (1)
Technical Information (2)
Quality initiatives for human identity testing and forensics 
Additional Resources (1)
Application Notes (2)
Application Note Investigator Casework GO!  Kit
Application Note Skin flake isolation with the Investigator Casework GO! Kit
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)

FAQ

Why is DTT used only for semen samples?
The DTT breaks down the protein disulfide bridges that make up the sperm nuclear membranes. Thus, DTT is always required for semen lysis.

It may also be used for all samples to keep the process simple, but it is not required to lyse blood, epithelial cells, etc. 
FAQ ID - 143761
Is it possible to use Lyse&Spin baskets?
It is possible, but modifications to the heat incubation is required because the temperature transfer to the sample might decrease due to the two plastic walls of the vessel.

This could reduce the yield and ProtK inactivation efficiency.

Note: ProtK inactivation must be done after sample collection and removal of the basket.
FAQ ID - 143762
How long are sample lysates stable in the fridge/ freezer?
Store samples at 2–8°C for storage up to 2 years, or at −30°C to −15°C for storage periods >2 years.

FAQ ID - 143765
How critical is the time of the temperature change from 60°C to 80°C?
There is no adverse effect for samples remaining in the heater during temperature increase. Nor does it make a difference if samples are kept on the bench until the heater has reached its temperature.

If only one heater shaker is available, the protocol will take a few minutes longer than the usual processing time.
FAQ ID - 143768
If 400 µl are used as lysis volume, how do I concentrate the lysate? (Otherwise the DNA would be too diluted.)
Different concentration devices are available on the market, but are not tested with the kit. Testing needs to be done first by customer.

Another helpful modification is the starting lysis volume, which can be reduced for most of the swab type to 200 µl. This helps to have higher sample concentrations.




FAQ ID - 143766
What if only one heater shaker is available?
The usage of only one heater shaker does not adversely affect the outcome.

The process will just last a few minutes longer than the usual processing time.
FAQ ID - 143764
Can the lysis volume be reduced for higher sensitivity?
The ideal lysis volume needs to be determined for each collection device.

For cotton swabs (e.g. Sarstedt Forensic swabs), 200 µl are usually sufficient.

Cuttings can be lysed with 100 µl Casework Go! Buffer depending on the size.
FAQ ID - 143763
Why is there no male DNA obtained from sexual assault samples?
DTT is not stable. The 1M solution should be stored frozen in small aliquots (50 µl) and disposed after thawing.

Repeat with freshly made DTT solution.
FAQ ID - 143767