miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT Kit

• Phenolfreie miRNA-Isolierung aus Serum- und Plasmaproben von Mensch, Maus und Ratte
• Einfache und zuverlässige automatisierte Verarbeitung spart Zeit und Kosten
• Hochwertige miRNA, die sich für jede nachfolgende Anwendung eignet
• Konsistente miRNA-Ausbeute aus kleinen Mengen an Ausgangsmaterial

Das miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT Kit ist für die automatisierte Hochdurchsatz-Aufreinigung zellfreier Gesamt-RNA - hauptsächlich miRNA und andere kleine RNA - aus kleinen Mengen Serum und Plasma auf dem QIAcube HT konzipiert. Mit der bewährten RNeasy Silikamembran-Technologie im praktischen 96-Well-Format werden Verunreinigungen und Inhibitoren entfernt, um qualitativ hochwertige RNA für die nachgeschaltete Analyse zu erhalten.

Das miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT Kit ist die Version des miRNeasy Serum/Plasma Advanced Kits für den mittleren bis hohen Durchsatz und bietet die gleiche Ausbeute und Qualität an RNA unter Nutzung der phenolfreien Isolierungstechnologie (siehe Abbildungen  Leistung vergleichbar mit manuellem Kit bei gleichen Volumina und  Leistung vergleichbar mit manuellem Kit bei gleichen RNA-Mengen). Das miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT Kit isoliert effizient Gesamt-RNA, einschließlich miRNA, aus menschlichen und tierischen Serum- und Plasmaproben von 50 µl bis 200 µl ( Verarbeitung unterschiedlicher Plasmamengen). Das Kit ist mit den meisten Blutentnahmevorrichtungen kompatibel (siehe Abbildung  Kompatibilität mit verschiedenen Blutentnahmeröhrchen). Das phenolfreie Protokoll nutzt die einfach zu automatisierende Spin-Säulen-Technologie im 96-Well-Format und minimiert den Zeitaufwand für den Anwender. Im Gegensatz zu Kits anderer Anbieter kombiniert das miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT Kit Benutzerfreundlichkeit und ein phenolfreies Protokoll ohne Kompromisse bei der RNA-Qualität oder -Ausbeute (siehe Abbildung  Vergleichbare oder bessere Ausbeuten und Leistung).

Das miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT Kit ermöglicht die automatisierte Aufreinigung zellfreier Gesamt-RNA – hauptsächlich miRNA und anderer kleiner RNA aus 20–200 µl menschlichem oder tierischem Plasma unter Einsatz des QIAcube HT Geräts. Die selektiven Bindungseigenschaften einer Silikamembran werden mit einem Hochdurchsatzformat mit 96 Vertiefungen für die vollautomatische Parallelverarbeitung von 24–96 Proben auf dem QIAcube HT Gerät kombiniert. Das Kit kombiniert eine Guanidin-basierte Lyse der Proben, einen Schritt zur Entfernung von Inhibitoren und eine Silikamembran-basierte Aufreinigung der Gesamt-RNA.

Das System bietet zwei Protokolle: ein Transferprotokoll, um das Lysat vom Proteinausfällungsschritt auf die RNeasy 96 Platte zu überführen, und das Protokoll zur Isolierung zellfreier RNA, um miRNA aus dem Lysat zu extrahieren. Die Verfahren liefern qualitativ hochwertige RNA, die sich gut für nachfolgende Anwendungen eignet.

Die Lyse wird manuell unter stark denaturierenden Bedingungen mit Guanidinthiocyanat durchgeführt, um RNasen sofort zu inaktivieren und die Aufreinigung intakter RNA zu gewährleisten (siehe Abbildung  miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT Kit Verfahren).

Nach Laufbeginn wird dem RNA-haltigen Überstand Isopropanol zugesetzt, um geeignete Bindungsbedingungen für alle RNA-Moleküle ab etwa 18 Nukleotiden (nt) zu schaffen. Die Proben werden anschließend (manuell oder automatisch) in die Vertiefungen der RNeasy 96-Platte übertragen. Die Gesamt-RNA bindet und Verunreinigungen werden effizient weggewaschen. Die qualitativ hochwertige RNA wird dann in RNase-freiem Wasser eluiert und kann für jede nachfolgende Anwendung genutzt werden.

Das miRNeasy 96 Advanced QIAcube HT Kit isoliert zellfreie und exosomale Gesamt-RNA aus Plasma und Serum. Zu den nachgelagerten Anwendungen zählen:

• Erkennung von Biomarkern
• Erstellung von Expressionsprofilen
• Next Generation Sequencing
• Quantitative Echtzeit-PCR (RT-PCR)
• Microarray-Analyse