miRCURY LNA RT Kit

• Optimiert für beide Nachweismethoden von miRCURY LNA miRNA PCR-Assays und -Panels
• Schnelle, einfache und zuverlässige Erststrangsynthese
• Enthält RNA Spike-in-Template zur Leistungsüberwachung

Das miRCURY LNA RT Kit ermöglicht schnelle und bequeme miRNA-Polyadenylierung und reverse Transkription in nur einem Reaktionsschritt. Die Verwendung einer einzelnen universellen RT-Reaktion als Template für nachfolgende PCR-Amplifikationen vereinfacht den Vorgang wesentlich im Vergleich mit Systemen, die eine miRNA-spezifische Erststrangsynthese erfordern – für mehr Komfort und Zeitersparnis. Das Kit wurde für den Einsatz mit den beiden miRCURY LNA miRNA PCR Systemen entwickelt, wobei als Nachweismethode entweder SYBR Green oder eine LNA-optimierte Hydrolysesonde verwendet wird. Das Kit enthält zwei separate Reaktionspufferröhrchen für die jeweilige PCR-Nachweismethode.

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Vereinfachte reverse Transkription spart Zeit und Ressourcen

Bei Verwendung einer universellen reversen Transkriptionsreaktion für jede RNA-Probe sparen Sie nicht nur Reagenzien und wertvolle Proben, sondern auch Zeit. Das miRCURY LNA RT Kit wird für die cDNA-Erststrangsynthese in beiden miRCURY LNA miRNA PCR Systemen verwendet, wobei für den Nachweis SYBR Green (siehe Überblick über das miRCURY LNA miRNA PCR System) oder eine LNA-optimierte, miRNA-spezifische Hydrolysesonde (see Überblick über das miRCURY LNA miRNA Probe PCR System) eingesetzt wird. Das Kit enthält einen Reaktionspuffer, der für jedes System spezifisch ist. Die miRNA-Assays und -Panels sind systemspezifisch.

Unübertroffene Sensitivität

Die universelle reverse Transkription in Kombination mit LNA-optimierten und T_m-normalisierten PCR-Komponenten ermöglicht eine genaue und zuverlässige Quantifizierung einzelner miRNAs schon ab 1 pg Gesamt-RNA (siehe Abbildung Genaue Quantifizierung schon ab einem Ausgangsmaterial von 1 pg Gesamt-RNA). Dank einer außergewöhnlichen Sensitivität und einem extrem schwachen Hintergrundsignal können Sie sehr geringe Konzentrationen von miRNA ohne Präamplifikation präzise quantifizieren. Damit eignen sich das miRCURY LNA miRNA PCR System und das miRCURY LNA miRNA Probe PCR System für alle Probentypen, insbesondere solche mit geringem RNA-Gehalt, wie Serum, Plasma und andere biologische Flüssigkeiten.

Schnell und einfach

Das miRCURY LNA RT Kit ist der erste Schritt für die miRCURY LNA miRNA PCR Systeme, mit Nachweis auf Basis von SYBR Green oder einer Hydrolysesonde. Das benutzerfreundliche, 2-stündige Protokoll spart Zeit und Arbeit. Durch die Verwendung einer universellen reversen Transkription sowie optimierten RT-PCR-Protokollen wird das Verfahren im Vergleich zu anderen Lösungen wesentlich vereinfacht. Darüber hinaus kann die im RT-Schritt generierte cDNA über das gesamte von Ihnen gewählte System hinweg verwendet werden. Damit können Sie je nach den Anforderungen Ihrer Forschung nahtlos von Panels zu Assays übergehen und Probenmaterial und Zeit sparen. Die Anzahl der Pipettierschritte und damit die technische Variation werden auf ein Minimum reduziert. Dieser vereinfachte Workflow ermöglicht in Verbindung mit der ISO-konformen Assay-Herstellung eine äußerst hohe Reproduzierbarkeit von Tag zu Tag sowie von Standort zu Standort.

Ein miRCURY LNA RT Kit für zwei Nachweissysteme

Das miRCURY LNA RT Kit wird für beide miRCURY LNA miRNA PCR Systeme verwendet, entweder für den Nachweis mit SYBR Green oder mit Hydrolysesonde. Dieses Kit enthält zwei systemspezifische Reaktionspuffer sowie alle notwendigen Reagenzien, um eine schnelle und bequeme miRNA-Polyadenylierung und reverse Transkription in einem Reaktionsschritt durchzuführen. Die Verwendung einer einzigen, universellen RT-Reaktion als Template für nachfolgende PCR-Amplifikationen vereinfacht das Verfahren wesentlich im Vergleich zu Systemen, die eine miRNA-spezifische Erststrangsynthese erfordern (siehe Abbildung Vorteil eines universellen reversen Transkriptionsschrittes). Darüber hinaus kann die im RT-Schritt generierte cDNA über das gesamte von Ihnen gewählte System hinweg verwendet werden. Damit können Sie je nach den Anforderungen Ihrer Forschung nahtlos von Panels zu Assays übergehen und Probenmaterial und Zeit sparen. Das UniSp6 RNA Spike-in aus diesem Kit kann in Verbindung mit dem Kontrollassay – UniSp6 miRCURY LNA miRNA PCR Assay – als Positivkontrolle für die reverse Transkription und/oder als Inter-Plate-Kalibrator in unseren miRNA PCR Panels verwendet werden.

miRCURY LNA miRNA PCR System (SYBR Green)

Die Architektur dieses Systems besteht aus einem SYBR Green-Nachweis mit zwei LNA-optimierten und miRNA-spezifischen Primern, die eine unübertroffene Leistung ermöglichen (siehe Überblick über das miRCURY LNA miRNA PCR System).

• miRCURY LNA RT Kit
• RNA Spike-In Kit
• miRCURY LNA SYBR Green PCR Kit
• miRCURY LNA miRNA PCR Assays (vordefiniert, Custom)
• miRCURY LNA miRNA PCR Panels (miRNome, Focus, Custom)

miRCURY LNA miRNA Probe PCR System

Eine einzigartige, LNA-optimierte, miRNA-spezifische Hydrolysesonde in Kombination mit einem LNA-optimierten, miRNA-spezifischen Vorwärts-Primer für hoch spezifische und sensitive echte Signale (siehe Überblick über das miRCURY LNA miRNA Probe PCR System).

• miRCURY LNA RT Kit
• RNA Spike-In Kit
• miRCURY LNA Probe PCR Kit
• miRCURY LNA miRNA Probe Assays (vordefiniert, Custom)
• miRCURY LNA miRNA Probe Panels (miRNome, Focus, Custom)

Reverse Transkriptionsreaktionen können einfach als Einzelröhrchenreaktionen durchgeführt werden. Als Ausgangsmaterial dient Gesamt-RNA, einschließlich miRNA. Die Reaktion wird bei 40 – 42 °C für 1 Stunde inkubiert und anschließend durch eine kurze Inkubation bei 95 °C inaktiviert.

Als Teil des miRCURY LNA miRNA PCR und Probe PCR Systems wird das miRCURY LNA RT Kit für folgende Applikationen verwendet:

• miRNA-Expressionsnachweis, -Profilierung und -Quantifizierung
• Entwicklung von miRNA-Biomarkern – Screening und Identifizierung
• Analyse von miRNA-Regulation und -Signalwegen
• miRNA-Nachweis in komplexen Probentypen und Proben mit niedrigem miRNA-Expressionsniveau
• snoRNA-Nachweis
• Validierung der miRNA-Sequenzierung