miRCURY LNA Probe PCR Kits

• Optimiert und speziell zugeschnitten auf miRCURY LNA miRNA Probe PCR-Assays und -Panels
• Kurze LNA-optimierte, miRNA-spezifische PCR-Komponenten eliminieren unspezifische Amplifikation und Primer-Dimere
• Sensitive und spezifische Leistung mit den neuesten QuantiNova-Enzymen
• Hohe Robustheit der Reaktion für die Einrichtung und Automatisierung bei Raumtemperatur
• Enthält den miRCURY Probe PCR Universal Reverse Primer

Die miRCURY Probe PCR Kits enthalten einen leistungsstarken PCR-Master-Mix, der speziell für die sondenbasierte Quantifizierung von miRNA mit miRCURY LNA miRNA Probe PCR-Assays und -Panels entwickelt wurde. Die reverse Transkriptase erfolgt mit dem miRCURY LNA RT Kit. Die miRCURY Probe PCR Kits wurden für die Verwendung mit einem beliebigen Real-time-Thermocycler optimiert.

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Einzigartige Optionen für das Design von Primern und Sonden

Das miRCURY LNA miRNA Probe PCR System ist ein bahnbrechendes System für Nachweis und Quantifizierung von miRNA. Durch den Einsatz der LNA-Technologie wird es möglich, neue Primer und Sonden zu designen, die die Spezifizität und Sensitivität der Assays erheblich verbessern. Einerseits haben die LNA-optimierten Primer und die Sonde eine höhere T_m, was die Reaktionsstringenz erhöht und die Differenzierung von miRNAs ermöglicht, die sich nur in einem einzigen Nukleotid unterscheiden, unabhängig vom AU-Gehalt. Andererseits sind der Vorwärts-Primer und die Sonde miRNA-spezifisch und kürzer als bei anderen Nachweissystemen (siehe  Überblick über das miRCURY LNA miRNA Probe PCR System). Dadurch wird das Assay-Design flexibler, und die intelligente Platzierung von LNAs bewirkt eine wesentliche Verbesserung der Spezifität und Sensitivität des Assays. Das System erlaubt sogar eine Quantifizierung bis zu einer (1) Kopie einer Ziel-miRNA ohne Präamplifikation. Darüber hinaus ist der Arbeitsablauf schnell und einfach – von der RNA bis zu den Daten dauert es nur 2 Stunden – und die außergewöhnliche Robustheit des Assays ermöglicht ein Setup bei Raumtemperatur sowie verzögerte Läufe für mehr Flexibilität und den Einsatz in der Automatisierung (siehe  Reaktionsstabilität und Setup-Robustheit). Die QuantiNova-Enzyme gewährleisten auf Anhieb hochgradig reproduzierbare Ergebnisse zwischen technischen und biologischen Replikaten (siehe  Prinzip des neuartigen QuantiNova- Hot-Start-Mechanismus).

Schnell und einfach

Das benutzerfreundliche, 2-stündige Protokoll spart Zeit und Arbeit. Durch die Verwendung einer universellen Transkription sowie optimierter RT-PCR-Protokolle wird das Verfahren im Vergleich zu anderen Lösungen wesentlich vereinfacht. Darüber hinaus kann die im RT-Schritt generierte cDNA über das gesamte miRCURY LNA miRNA Probe PCR System hinweg verwendet werden. Damit können Sie je nach den Anforderungen Ihrer Forschung nahtlos von Panels zu Assays übergehen und Probenmaterial und Zeit sparen. Die Anzahl der Pipettierschritte und damit die technische Variation werden auf ein Minimum reduziert. Dieser vereinfachte Workflow sorgt in Verbindung mit der ISO-konformen Assay-Produktion (siehe  Große Übereinstimmung von Charge zu Charge) für eine äußerst hohe Reproduzierbarkeit von Tag zu Tag sowie von Standort zu Standort.

Leistungsstarke Reagenzien für die quantitative Real-time-PCR

Das miRCURY LNA miRNA Probe PCR System ermöglicht die sensitive, spezifische miRNA-Quantifizierung und -Profilerstellung durch Real-time PCR. Der Nachweis beruht auf einer Hydrolysesonde mit Quencher-Markierung. Das System deckt alle Schritte ab, die für die Umwandlung von miRNA in cDNA und für den anschließenden qPCR-Nachweis von miRNAs erforderlich sind. Die miRCURY LNA miRNA Probe PCR Assays und Panels wurden mit dem QuantiNova Probe Master Mix validiert; die Verwendung anderer Reagenzien für die qPCR beeinflusst die Ergebnisse.

RNA Spike-In Kit für RT

Das RNA Spike-In Kit dient zur Qualitätskontrolle der Schritte zur RNA-Isolierung, cDNA-Synthese und PCR-Amplifikation in miRCURY LNA miRNA Probe PCR Experimenten, damit Sie Proben schlechter Qualität frühzeitig identifizieren und Zeit und Reagenzien sparen können. Das Kit enthält einen UniSp2, UniSp4 und UniSp5 RNA Spike-in Template Mix und das cel-miR-39-3p RNA Spike-in Template.

miRCURY LNA RT Kit

Ein universelles Reverse-Transkription-Kit für zwei Nachweissysteme. Das miRCURY LNA RT Kit wird sowohl für das miRCURY LNA miRNA PCR System, das für den Nachweis SYBR^® Green verwendet, als auch für das sondenbasierte miRCURY LNA miRNA Probe PCR System eingesetzt. Das Kit enthält zwei systemspezifische Reaktionspuffer sowie alle Reagenzien, die zur schnellen und bequemen Durchführung von miRNA-Polyadenylierung und reverser Transkription in einem Reaktionsschritt erforderlich sind.

miRCURY Probe PCR Kit

Dieses Kit enthält den leistungsstarken QuantiNova Probe Master Mix und den miRCURY Probe PCR Universal Reverse Primer. In Kombination mit einem miRCURY LNA miRNA Probe CR Assay oder einem miRCURY LNA miRNA Probe PCR Panel ermöglicht die Chemie den miRNA-Nachweis mit quantitativer Real-time PCR.

miRCURY LNA miRNA Probe PCR Assays

Diese Primer- und Sonden-Assays verwenden miRNA-spezifische Hydrolysesonden und miRNA-spezifische Vorwärts-Primer, die dazu konzipiert sind, anhand der aktuellsten Sequenzinformationen in der miRBase 22 reife miRNAs nachzuweisen. Der miRCURY Probe Universal Reverse Primer ist im miRCURY Probe PCR Kit enthalten.

miRCURY LNA miRNA Probe PCR Panels

Gebrauchsfertige, vorgefertigte PCR-Panel-Platten für den Einmalgebrauch für die schnelle Erstellung von Profilen reifer miRNAs mit Schwerpunkt auf dem miRNome, spezifischen Signalwegen, bestimmten Probentypen wie Serum/Plasma oder in einem benutzerdefinierten Panel.

GeneGlobe Data Analysis Center

Dieses kostenlose, intuitiv zu bedienende, webbasierte Analysetool führt Sie mit Hilfe eines einfachen Assistenten Schritt für Schritt durch die Normalisierung und Analyse Ihrer Daten und erstellt publikationsreife Abbildungen.

Der erste Schritt, die reverse Transkriptionsreaktion, ist eine einfach durchführbare Einzelröhrchen-Reaktion. Gesamt-RNA, einschließlich miRNA, wird als Ausgangsmaterial eingesetzt, und die resultierende cDNA wird bei der Real-time-PCR-Amplifikation mit LNA-optimierter Sonde und LNA-optimiertem Primer für den Nachweis der reifen miRNAs verwendet. Dies ermöglicht eine unkomplizierte miRNA-Quantifizierung und -Profilierung, die für jedes Labor mit einem Realtime-PCR-Cycler zugänglich ist.

Als Bestandteil des miRCURY LNA miRNA Probe PCR Systems werden die miRCURY Probe PCR Kits für folgende Applikationen verwendet:

• miRNA-Expressionsnachweis, -Profilierung und -Quantifizierung
• Entwicklung von miRNA-Biomarkern – Screening und Identifizierung
• Analyse von miRNA-Regulation und -Signalwegen
• miRNA-Nachweis in komplexen Probentypen und Proben mit niedrigem miRNA-Expressionsniveau
• snoRNA-Nachweis
• Validierung der miRNA-Sequenzierung