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FlexiGene DNA Kit (250)
Cat. No. / ID: 51206
Für die Isolierung von genomischer DNA aus Vollblut, Buffy Coat und Kulturzellen in einem einzelnen Röhrchen mit einem schnellen Präparations-Kit
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Dieses Produkt enthält Stoffe, die unter REACH (EG 1907/2006 Anhang XIV) geregelt sind. Die Verwendung dieses Produkts in der EU ist im Rahmen einer Ausnahmeregelung zulässig (Artikel 56(3)). Weitere Informationen finden Sie in der REACH-Meldung und im Sicherheitsdatenblatt zu diesem Produkt, die beide im Abschnitt „Ressourcen“ dieser Seite zu finden sind.
FlexiGene DNA Kit ist für molekularbiologische Anwendungen vorgesehen. Dieses Produkt ist nicht für die Diagnose, Prävention oder Behandlung einer Krankheit bestimmt.
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Eigenschaften
- Einfache Handhabung, kein Risiko einer Probenverwechslung
- Skalierbare Aufreinigung aus 0,1–20 ml Vollblut
- Direkte Aufreinigung aus Vollblut, Buffy Coat und Kulturzellen
- Schnelles Verfahren
- Keine organische Extraktion
Angaben zum Produkt
Das FlexiGene System nutzt eine einfache Zentrifugation, um hochreine DNA aus Vollblut, Buffy Coat und Kulturzellen zu isolieren. Das FlexiGene DNA Kit enthält Puffer und QIAGEN Protease für eine direkte, einfache Aufreinigung in nur einem Röhrchen. Für automatisierte Lösungen mit FlexiGene Reagenzien wenden Sie sich an Autogen, Inc.
Leistung
Die mit dem FlexiGene System aufgereinigte DNA hat eine Größe von bis zu 150 kb (siehe Abbildung „ Hochqualitative genomische DNA“). Sie liefert gute Ergebnisse in Amplifikations- und Southern-Blotting-Experimenten und eignet sich auch für die Archivierung (siehe Abbildung „ Effiziente nachgelagerte PCR-Analyse“).
DNA wird mittels Zentrifugation in einem einzelnen Röhrchen aus 0,1–20 ml (Blut), 0,1–2 ml (Buffy Coat) oder 1–2 x 106 Zellen (Kulturzellen) aufgereinigt. In 1 Stunde können zwölf Proben bearbeitet werden. Abhängig von der Probengröße beträgt das Rehydratisierungsvolumen 0,2–1 ml.
| Probe | Volumen | DNA-Ausbeute (µg) |
|---|---|---|
| Blut* | 0,3 ml | 11–14 |
| Blut* | 2,0 ml | 75–90 |
| Blut* | 10,0 ml | 380–460 |
| Buffy Coat | 0,5 ml | 110–130 |
| HeLa-Zellen | 106 Zellen | 25–35 |
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Prinzip
Das FlexiGene DNA System ermöglicht die Isolierung von genomischer DNA aus variablen Mengen an Vollblut, Buffy Coat und Kulturzellen. Das simple Aufreinigungsverfahren wird in einem einzigen Röhrchen durchgeführt, was Kosten senkt und die Handhabung vereinfachtt. Die aufgereinigte DNA liefert gute Ergebnisse in sensitiven nachgelagerten Applikationen.
Verfahren
Der erste Schritt ist die Zugabe von Lysepuffer zu den Proben (siehe Flussdiagramm „ FlexiGene DNA Verfahren“). Zellkerne und Mitochondrien werden durch Zentrifugation pelletiert und in Denaturierungspuffer mit QIAGEN Protease resuspendiert. Nach dem Proteinverdau wird die DNA durch Zugabe von Isopropanol ausgefällt, durch Zentrifugation abgetrennt, in 70 % Ethanol gewaschen und getrocknet. Die DNA wird in Hydratisierungspuffer resuspendiert und kann direkt in nachgelagerten Assays eingesetzt oder bei –20 °C gelagert werden. Aus Vollblut, Buffy Coat und Kulturzellen werden hohe Ausbeuten an DNA gewonnen (siehe Tabelle „DNA-Ausbeute bei Aufreinigung aus verschiedenen Probentypen mit dem FlexiGene Verfahren“).
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Anwendungen
Die mit dem FlexiGene DNA Kit aufgereinigte DNA liefert gute Ergebnisse in nachgelagerten Applikationen wie
- PCR
- Southern Blotting
- Archivierung
Ergänzende Daten und Abbildungen
FlexiGene DNA Verfahren.
Der erste Schritt ist die Zugabe von Lysepuffer zu den Proben. Zellkerne und Mitochondrien werden durch Zentrifugation pelletiert und in Denaturierungspuffer mit QIAGEN Protease resuspendiert. Nach dem Proteinverdau wird die DNA durch Zugabe von Isopropanol ausgefällt, durch Zentrifugation abgetrennt, in 70 % Ethanol gewaschen und getrocknet. Die DNA wird in Hydratisierungspuffer resuspendiert und kann direkt in nachgelagerten Assays eingesetzt oder bei –20 °C gelagert werden.
Specifications
| Features | Specifications |
|---|---|
| Applications | PCR-Techniken, Restriktionsverdau, Southern Blotting, Sequenzierung |
| Sample amount | 100 µl–20 ml |
| Format | Skalierbar |
| Time per run or per prep | 25–45 Minuten (+ DNA-Rehydratisierung) |
| Main sample type | Vollblut, Buffy Coat, Kulturzellen |
| Technology | Einzelröhrchen-Ausfällmethode |
| Processing | Manuell |
| Yield | 35 µg/ml Vollblut |
| Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein | Genomische DNA |
| Elution volume | 200 µl–1000 µl |
Ressourcen
Kit Handbooks (1)
Additional Resources (2)
Supplementary Protocols (1)
Safety Data Sheets (1)
Certificates of Analysis (1)
Publications
The (TAAAA)n microsatellite polymorphism in the SHBG gene influences serum SHBG levels in women with polycystic ovary syndrome.
Hum Reprod; 2006; 22 (4):1031-6 2006 Dec 22 PMID:17189294
A functional SNP of interferon-gamma gene is important for interferon-alpha-induced and spontaneous recovery from hepatitis C virus infection.
Proc Natl Acad Sci U S A; 2007; 104 (3):985-90 2007 Jan 10 PMID:17215375
Lipopolysaccharide-activated CD4+CD25+ T regulatory cells inhibit neutrophil function and promote their apoptosis and death.
J Immunol; 2006; 177 (10):7155-63 2006 Nov 15 PMID:17082633
Predictors of vitamin B6 and folate concentrations in older persons: the InCHIANTI study.
Clin Chem; 2006; 52 (7):1318-24 2006 May 11 PMID:16690736
Past adult lead exposure is linked to neurodegeneration measured by brain MRI.
Neurology; 2006; 66 (10):1476-84 2006 May 23 PMID:16717205
FAQ
Do you have a protocol for purification of DNA from clotted blood using the FlexiGene DNA Kit?
Do you have stability data for genomic DNA isolated with the Flexigene DNA Kit?
Do you have a protocol for the isolation of genomic DNA from frozen clotted blood?
What is the composition of Buffer FG3?
Does the Epitect Bisulfite Kit also work on DNA extracted from plants?