MinElute Reaction Cleanup Kit

• Sehr kleine Elutionsvolumen
• Schnelles Verfahren und einfache Handhabung
• Hohe, reproduzierbare Rückgewinnung
• Gel-Ladefarbstoff für komfortable Probenanalyse

Das MinElute Reaction Cleanup Kit enthält Spin-Säulen, Puffer und Sammelröhrchen für die Silikamembran-basierte Aufreinigung von DNA mit einer Größe von 70 bp – 4 kb aus enzymatischen Reaktionen. Die Spin-Säulen ermöglichen die Elution in sehr kleinen Volumen (bis zu 10 µl) und liefern hohe Ausbeuten an hochkonzentrierter DNA. Ein integrierter pH-Indikator erlaubt die einfache Bestimmung des optimalen pH-Werts für die DNA-Bindung an die Spin-Säule. Das Verfahren kann auf dem QIAcube Connect vollständig automatisiert werden. Die mit dem MinElute System aufgereinigten DNA-Fragmente können direkt für alle Anwendungen genutzt werden, einschließlich Sequenzierung, Microarray-Analyse, Ligation und Transformation, Restriktionsverdau, Markierung, Mikroinjektion, PCR und In-vitro-Transkription.

Für optimale Ergebnisse wird empfohlen, dieses Produkt zusammen mit QIAvac 24 Plus zu verwenden.

Das MinElute Reaction Cleanup Kit ermöglicht die Reinigung von bis zu 5 µg DNA (70 bp bis 4 kb) aus enzymatischen Reaktionen und liefert eine hohe Ausbeute an DNA, die für eine Vielzahl von Anwendungen geeignet ist. Das Kit enthält Spin-Säulen für den Cleanup enzymatischer Reaktionen. Mithilfe einer Mikrozentrifuge oder eines Vakuumverteilers können schnell hohe Konzentrationen an DNA-Fragmenten (70 bp – 4 kb) erreicht werden. (DNA-Fragmente größer als 4 kb sollten mit dem QIAquick System aufgereinigt werden.)

MinElute Kits enthalten eine Silika-Membraneinheit für die Bindung von DNA in Hochsalzpuffer und die Elution mit Niedrigsalzpuffer oder Wasser. Durch die Aufreinigung werden Primer, Nukleotide, Enzyme, Mineralöl, Salze, Agarose, Ethidiumbromid und andere Verunreinigungen aus DNA-Proben entfernt. Die Silika-Membrantechnologie beseitigt die Probleme und Schwierigkeiten, die mit losen Harzen und Suspensionen verbunden sind. Spezialisierte Bindepuffer sind für spezifische Anwendungen optimiert und fördern die selektive Adsorption von DNA-Molekülen innerhalb bestimmter Größenbereiche.

Gel-Ladefarbstoff

Der mitgelieferte Gel-Ladefarbstoff ermöglicht eine schnellere und bequemere Verarbeitung und Analyse der Proben. Der GelPilot Loading Dye enthält drei Farbstoffe zur Nachverfolgung (Xylencyanol, Bromphenolblau und Orange G), um die Optimierung der Agarosegel-Laufzeit zu erleichtern und zu verhindern, dass kleinere DNA-Fragmente zu weit migrieren (siehe Abbildung „ GelPilot Loading Dye“).

Das MinElute System nutzt ein einfaches Verfahren mit den Schritten „Binden-Waschen-Eluieren“ (siehe Flussdiagramm „ MinElute-Verfahren“). Der Bindepuffer wird direkt zur enzymatischen Reaktion hinzugefügt, und die Mischung wird auf die MinElute Spin Column aufgetragen. Zur einfachen Bestimmung des optimalen pH-Werts für die DNA-Bindung enthält der Bindepuffer einen pH-Indikator (siehe Abbildung  „pH-Indikatorfarbstoff“). Die Nukleinsäuren werden unter den Hochsalzbedingungen des Puffers an die Silikamembran adsorbiert. Verunreinigungen werden durch Waschen entfernt, und die reine DNA wird in einem kleinen Volumen des mitgelieferten Niedrigsalzpuffers oder mit Wasser eluiert und kann direkt für nachfolgende Anwendungen verwendet werden.

Handhabung

MinElute Spin Columns sind so konzipiert, dass sie zwei praktische Handhabungsoptionen bieten (siehe Flussdiagramm „MinElute-Verfahren“). Die Spin-Säulen passen in herkömmliche Tisch-Mikrozentrifugen und auf jeden Vakuumverteiler mit Luer-Anschlüssen, beispielsweise QIAvac 24 Plus und QIAvac 6S mit QIAvac Luer Adapters. Das MinElute Reaction Cleanup Kit kann, ebenso wie andere QIAGEN Kits auf Spin-Säulen-Basis, vollständig auf dem QIAcube Connect automatisiert werden, was eine höhere Produktivität und Standardisierung der Ergebnisse ermöglicht (siehe Abbildungen „Handhabungsoptionen für Spin-Säulen  A,  B,  C,  D und  E“ und „ QIAcube Connect“).

Die mit dem MinElute System aufgereinigten DNA-Fragmente lassen sich direkt für alle Anwendungen verwenden, darunter:

• Sequenzierung
• Microarray-Analyse
• Ligation und Transformation
• Restriktionsverdau
• Markierung