QuickLyse Miniprep Kit

Zur schnellen Aufreinigung von bis zu 15 µg Plasmid in Sequenzierqualität

✓ Automatische Verarbeitung von Online-Bestellungen 24/7

✓ Sachkundiger und professioneller technischer und Produkt-Support

✓ Schnelle und zuverlässige (Nach-)Bestellung

QuickLyse Miniprep Kit (250)

Cat. No. / ID: 27406

250 QuickLyse Spin Columns, Reagenzien, Puffer, Lyse- und Collection Tubes (2 ml)

QuickLyse Miniprep Kit ist für molekularbiologische Anwendungen vorgesehen. Dieses Produkt ist nicht für die Diagnose, Prävention oder Behandlung einer Krankheit bestimmt.

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Eigenschaften

Schnelles einstufiges Lyseverfahren
Weniger Protokollschritte und weniger Zeitaufwand für die Handhabung
Bis zu 15 µg DNA aus 1,5 gewonnenen Kulturvolumina
Gebrauchsfertige Plasmid-DNA in nur 9 Minuten

Angaben zum Produkt

Das QuickLyse Miniprep Kit bietet ein schnelles, auf einer Spin-Säule basierendes Verfahren zur Isolierung von Plasmid-DNA in Sequenzierqualität. Resuspension von Bakterienzellen, Lyse und DNA-Bindung werden in einem einzigen Puffer durchgeführt, was zur schnellen DNA-Aufreinigung bei minimalem Zeitaufwand führt.

Leistung

Das QIAGEN QuickLyse Miniprep Kit arbeitet mit einer einstufigen Lyse-Technologie für die ultraschnelle Präparation von bis zu 15 µg Plasmid-DNA. Die Qualität der DNA gewährleistet eine robuste Leistung bei Anwendungen wie Sequenzierung, Restriktionsanalysen und Klonierung (siehe Abbildung „ Reproduzierbare Ausbeuten“).

Das QuickLyse Miniprep Kit liefert ausreichend Plasmid-DNA für alle nachgelagerten Anwendungen, einschließlich der Sequenzierung (siehe Abbildung „Lange Leselängen bei automatisierter Sequenzierung“). Aus 1,5 ml Bakterienkultur können bis zu 15 µg Plasmid-DNA mit hoher Kopienzahl gewonnen werden (siehe Abbildung „Hohe Ausbeute an hochwertiger Plasmid-DNA“). Die isolierte Plasmid-DNA weist ein OD₂₆₀_/280-Verhältnis von 1,7–1,9 auf, was bedeutet, dass die Qualität und Reinheit sich für alle sensitiven Anwendungen eignet. Es lassen sich leicht Sequenzierleselängen von mehr als 700 Basen erreichen.

Abbildungen ansehen

Reproduzierbare Ausbeuten.

Lange Leselängen bei der automatischen Sequenzierung.

Hohe Ausbeuten an hochwertiger Plasmid-DNA.

Prinzip

Im Gegensatz zu den meisten mit dreistufigen Lyseverfahren arbeitenden Protokollen kombiniert das QuickLyse Miniprep Kit enzymatische und osmotische Prozesse zur Lyse von Bakterienzellen in einem einzigen, dreiminütigen Schritt. Darüber hinaus benötigt die QuickLyse-Technologie weniger Puffer, was die Handhabung vereinfacht und Zeit spart: Die Herstellung von 24 Minipräps von Plasmid-DNA kann in weniger als 22 Minuten erfolgen.

Verfahren

Die Bakterienzellen werden resuspendiert und lysiert, und die DNA wird in einem einzigen Puffer gebunden, was eine schnelle DNA-Aufreinigung mit minimalem Zeitaufwand ermöglicht. Nach einem dreiminütigen Lyseschritt wird das bereinigte Lysat direkt auf eine QuickLyse Spin Column aufgetragen. Die Plasmid-DNA bindet an die Säulenmembran und wird nach einem einzigen Waschschritt eluiert (siehe Flussdiagramm „“). Die isolierte DNA kann direkt für Standardanwendungen wie automatische Sequenzierung, PCR, Restriktionsanalyse und Klonierung verwendet werden.

Abbildungen ansehen

QuickLyse Verfahren.

Anwendungen

Das QuickLyse Miniprep Kit liefert ausreichend Plasmid-DNA für jede nachgeschaltete Anwendung, einschließlich der automatischen Sequenzierung.

Ergänzende Daten und Abbildungen

Hohe Ausbeuten an hochwertiger Plasmid-DNA.

Typische DNA-Ausbeute und -Reinheit aus 1,5 ml Bakterienkultur (LB-Medium) für verschiedene Zellen und Vektoren.

Specifications

Features	Specifications
Applications	Automatisierte Sequenzierung, PCR, Restriktionsanalyse, Klonierung usw.
Time per run or prep per run	9 min
Culture volume/starting material	1,5 ml Kulturvolumen
Plasmid type	Cosmid-DNA mit hohem Kopienanteil
Elution volume	50 µl
Samples per run (throughput)	1–24 Proben pro Lauf
Technology	QuickLyse Technologie
Yield	Bis zu 15 µg
Processing	Manuell (Zentrifugation)

Ressourcen

For purification of sequencing grade plasmid DNA

FAQ

The QuickLyse Miniprep Kit can be used for plasmids up to 9 kb in size. It is not recommended for Large-Construct purifications.

Please find an overview of additional kit options for small-scale Plasmid Purification on the QIAGEN website, or use our ProductFinder to select the right kit for your needs.

FAQ ID -1752

No, this is not possible since the columns do not fit properly on the QIAVac 24 Plus manifold and the vacuum is not strong enough.

Normally, 1.5 ml bacterial culture is used with the QuickLyse Miniprep Kit. Only if the OD600 is < 2.0, up to 3 ml culture may be used. Growth in LB medium is strongly recommended. Growth in nutrient-rich media, such as 2xYT, is not recommended.

FAQ ID -1357

When using the QuickLyse Miniprep Kit, the addition of 125 µl isopropanol to the lysate, prior to transferring it to the QuickLyse Spin Column, may increase plasmid DNA yield in some cases.

FAQ ID -1354

No. Vortexing for 30 seconds as described in the QuickLyse Miniprep Handbook is absolutely critical to resuspend and lyse the bacterial cells. Failure to follow this step will result in greatly reduced DNA yields.

FAQ ID -1352

Elution Buffer QLE of the QuickLyse Miniprep Kit contains 10 mM Tris-Cl and 0.1 mM EDTA (pH 8.5). Due to the very low concentration of EDTA, enzymatic downstream reactions such as PCR and cycle sequencing are not inhibited.

FAQ ID -1356

Yes, nuclease-free water may be used for the elution of plasmid DNA purified with the QuickLyse Miniprep Kit. However, for higher DNA stability and optimal yields, it is recommend to elute using the provided elution buffer (Buffer QLE).

FAQ ID -1355