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Cat. No. / ID: 929002
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QIAxcel Geräte ermöglichen in Verbindung mit QIAxcel DNA Kits eine vollautomatisierte Größenauftrennung und Quantifizierung von DNA-Fragmenten in bis zu 96 Proben je Lauf. Die QIAxcel Technologie basiert auf Kapillarelektrophorese mit Gelkartuschen und bietet unerreichte Auflösung, Geschwindigkeit und Durchsatz. Die QIAxcel Gelkartuschen sind wiederverwendbar und ermöglichen die Durchführung von bis zu 250 Läufe zu je 12 Proben. Für die meisten Applikationen geeignete Methoden sind vorinstalliert verfügbar. QIAGEN kann auch kundenspezifische Methoden für Anwenderinnen und Anwender erstellen.
Das QIAxcel DNA High Sensitivity Kit kann nur zusammen mit dem QIAxcel Connect verwendet werden. Alle anderen QIAxcel DNA Kits können entweder mit dem QIAxcel Connect oder QIAxcel Advanced Geräten verwendet werden. Die QIAxcel DNA Accessories sind mit allen QIAxcel DNA Kits kompatibel.
Genotypisierung von Organismen, PCR-basiertes cDNA-Bibliotheksscreening und viele andere Applikationen in der biomedizinischen Forschung und Molekularbiologie erfordern die Differenzierung von PCR-Fragmenten, die sich in der Größe nur um wenige Basenpaare unterscheiden. Das QIAxcel High Resolution Kit erlaubt in Kombination mit QIAxcel Geräten die Analyse von DNA-Fragmenten mit einer Größe zwischen 15 bp und 5 kb. Fragmente, die kleiner als 500 bp sind, können mit einer Auflösung von 3–5 bp aufgetrennt werden. Dies ermöglicht eine zuverlässigere Dateninterpretation als mit der herkömmlichen hochauflösenden Agarose-Gelelektrophorese (siehe Sensitiver Nachweis eines mutierten krebsassoziierten Gens). Bei einer Nachweissensitivität von 0,1 ng/µl DNA in unverdünnten Amplifikationsreaktionen bieten QIAxcel Geräte robustere Ergebnisse bei kleineren Mengen an eingesetztem Probenmaterial.
Das QIAxcel DNA Screening Kit eignet sich optimal für die routinemäßige Evaluierung von Fragmenten für den Verdau mit Restriktionsendonukleasen, qualitative Singleplex- oder Multiplex-PCR und andere DNA-Applikationen (siehe Hochauflösende Analyse von Multiplex-PCR-Proben). Die Verwendung von Kartuschen für das DNA-Screening optimiert den Labor-Workflow durch Minimierung der Analysezeit für Fragmente von 15 bp bis 5 kb Größe – 96 Proben werden in etwa 1 Stunde bearbeitet. Für Fragmente unter 1 kb kann eine Auflösung von 20–50 bp erreicht werden. Der Probenverbrauch liegt bei weniger als 0,1 µl, sodass nahezu Ihre gesamte wertvolle Probe für nachgelagerte Applikationen erhalten bleibt.
Das QIAxcel DNA Fast Analysis Kit eignet sich optimal für die routinemäßige Beurteilung von DNA-Fragmenten in qualitativen Single- oder Multiplex-PCR-Applikationen. Die Verwendung von Gelkartuschen für das DNA-Screening optimiert den Labor-Workflow durch Minimierung der Analysezeit für Fragmente von 15 bp bis 3 kb Größe – 12 Proben werden in nur 3 Minuten und 96 Proben in etwa 25 Minuten bearbeitet (siehe Screenshot mit Daten aus PCR-Fragmentanalyse). Mit der QIAxcel DNA Fast Analysis Gelkartusche kann eine Auflösung von bis zu 50 bp erzielt werden, wobei der Probenverbrauch bei weniger als 0,1 μl liegt.
Mit dem QIAxcel DNA High Sensitivity Kit können Sie DNA in Konzentrationen schon ab 5 pg/μl analysieren. Die Analysezeit für Fragmente von 15 bp–3 kb Größe beträgt für 12 Proben etwa 9 Minuten. Mit der QIAxcel DNA High Sensitivity Gelkartusche kann eine Auflösung von 20–50 bp erzielt werden.
QIAxcel Geräte nutzen Kapillargelelektrophorese, um eine schnelle, größenbasierte Auftrennung von Nukleinsäuren zu ermöglichen (siehe Prozess der Probenauftrennung). Anders als bei der traditionellen Agarose-Gelelektrophorese wird die Auftrennung in einer Kapillare einer gebrauchsfertigen Gelkartusche durchgeführt. Die Proben werden automatisch in eine einzelne Kapillare geladen und dann eine Spannung angelegt. Die negativ geladenen Nukleinsäuremoleküle wandern durch die Kapillare zum positiv geladenen Ende. Wie bei der Agarose-Gelelektrophorese wandern Moleküle mit niedrigem Molekulargewicht schneller als Moleküle mit hohem Molekulargewicht. Während die Moleküle durch die Kapillare wandern, passieren sie einen Detektor, der das Fluoreszenzsignal erfasst und misst. Ein Photomultiplier konvertiert das Fluoreszenzsignal in elektronische Daten, die dann zur weiteren Verarbeitung mit der QIAxcel ScreenGel Software auf den Computer übertragen werden. Nach der Verarbeitung werden die Daten als Elektropherogramm oder Gel-Bild dargestellt.
QIAxcel DNA Kits erleichtern die Auftrennung und Analyse von DNA-Fragmenten und sorgen für eine höhere Anwendersicherheit. Es sind nur wenige einfache Schritte erforderlich: Laden der Gelkartusche, Füllen und Laden des Pufferreservoirs, Laden der Proben in 96-Well-Platten oder PCR-Röhrchen oder -Streifen, Auswählen des gewünschten Prozessprofils und Starten. Aufwändige Gelvorbereitung und umfassende Anwenderschulung werden überflüssig, wodurch der Workflow optimiert und die Integration des Systems in die tägliche Laborroutine erleichtert wird. Schon Minuten nach Beginn des Laufs werden die ersten Ergebnisse in Echtzeit auf dem Computerbildschirm angezeigt (siehe Reduzierte Laufzeiten).
Vorprogrammierte Methoden erlauben in Kombination mit den entsprechenden Gelkartuschen die Auftrennung und Analyse einer Vielzahl von Nukleinsäuren, einschließlich einzelner oder mehrerer PCR-Fragmente, mit Restriktionsendonukleasen verdauter DNA und synthetisierter Oligonukleotide.
QIAxcel DNA High Resolution Kit | QIAxcel DNA High Sensitivity Kit§ | QIAxcel DNA Screening Kit | QIAxcel DNA Fast Analysis Kit | |
Größenbereich | 15 bp–20 kb; Anzeige von bis zu 50 kb | 15 bp–3 kb | 15 bp–5 kb | 15 bp–3 kb |
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Auflösung* | 3–5 bp | 20–50 bp | 20–50 bp | 50 bp |
Nachweisgrenze | 0,1 ng/μl | 5 pg/μl | 0,1 ng/μl | 0,1 ng/μl |
Proben je Kartusche | 1200 Proben | 1200 Proben | 2400 Proben | 3000 Proben |
Laufzeit† | 9–25 min | ~9 min | ~7 min | ~3 min |
Anwendungsbereich‡ |
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Die Nukleinsäureauftrennung auf dem QIAxcel System mit dem QIAxcel DNA High Resolution Kit nimmt weniger als 10 % der Zeit in Anspruch, die ein herkömmliches hochauflösendes Agarosegel erfordert.