Home / bh / spotlight-pages / newsletters-and-magazines / newsletters / jp-mirna-1-2
JP-miRNA-1-2
more..
Main Image Navi
Top products
1
Sort options
Sort alphabetically
Sort by relevance
miScript Primer Assays
For quantification of mature miRNA using the miScript PCR System
Show details
See products
Show all
Show less
Resources
Back to top
You are not authorized to download the resource
Technical Information
1
Sort options
Sort alphabetically
Show details
Show all
Show less
Images
miScript HiSpec Buffer を用いてmature miRNA をcDNA へ選択的に変換
miScript HiSpec Buffer を用いた逆転写反応で、mature miRNA はpoly (A) ポリメラーゼによりポリアデニル化され、次に逆転写酵素とoligo-dT プライマーによりcDNA に変換される。その後cDNA は、リアルタイムPCR を用いたmature miRNA の定量に使用される。
miScript PCR System の構成
miScript PCR System はmiRNA およびmRNA をcDNA に変換、およびSYBR Green を用いたリアルタイムPCR での検出まで、全てのステップをカバーする3 つのコンポーネントで構成されている。
プライマーのアニーリングにおける特異性が増加
QIAGEN PCRバッファー中のアンモニウムイオンとカリウムイオンにより、プライマーのアニーリングにおける特異性が増加。K
+
はDNA バックボーンのリン酸基(P
-
)に結合し、テンプレートへのプライマーアニーリングを安定化する。サーマルサイクリング条件下では、アンモニウムイオンおよびアンモニアの両方として存在するNH
4
+
は、塩基(B)間の水素結合に相互作用するため、ミスマッチの塩基間の水素結合を不安定にする。これら2 種類の陽イオンの組み合わせ効果により、幅広い温度範囲において非特異的なプライマーテンプレート結合に対する特異的な結合の比率が高く保たれる。
Contact QIAGEN
Global contacts
Technical Service
Customer Care